1、腺病毒:具有较高的免疫反应,因为腺病毒载体在宿主细胞中复制并产生病毒颗粒,从而触发免疫反应。腺相关病毒和慢病毒:免疫反应较低,尤其是腺相关病毒,其免疫反应极低。相对病毒滴度 腺病毒:病毒滴度较高,通常为10E10pfu/mL。腺相关病毒:病毒滴度极高,通常为10E13VG/mL。
2、如果需要进行动物实验,且需要高滴度的病毒液来满足实验需求,建议选择腺病毒载体。因为腺病毒载体可以通过扩增和纯化获得高滴度的病毒液,且一次包装足以完成一次动物实验研究。长期表达需求:如果需要长期、稳定地表达外源基因,建议选择慢病毒载体。

3、腺病毒载体: 区别:以非整合性方式表达外源基因,实现瞬时、高丰度的表达,避免了基因突变与随机效应。具有高滴度、大载体容量与不整合到染色体中的特性。 应用场景:因其高效表达能力、低免疫原性、广泛的宿主范围以及不整合性,适用于原代非增殖细胞研究,也是疫苗载体与基因治疗的优选。

4、慢病毒相较于腺病毒在实验中有其独特的优势,具体取决于实验需求。首先,慢病毒的转染效率较高,这意味着在实验中更容易成功实现基因传递。其次,慢病毒能够实现稳定转染,而腺病毒则为瞬时转染,这在需要长期观察基因表达情况的实验中显得尤为重要。
5、包括CMV质粒、EBV质粒,以及逆转录病毒载体如疱疹病毒、腺病毒、腺相关病毒、狂犬病毒。每种载体各有优劣势,例如慢病毒具有广泛细胞感染能力,腺相关病毒结构简单、安全性高。病毒载体的安全性与前景:腺病毒基因组容量大,但在包装过程中容易产生炎症反应,不适合作为基因治疗载体。
6、Q2:如何确定加入病毒的最佳时间?慢病毒感染后48-72小时可观察到基因表达,腺病毒则为36-48小时,应在细胞汇合度30%-50%且细胞状态良好时加入病毒。
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